裴叔业，河东闻喜人。曹魏冀州刺史裴徽的后人。五代祖裴苞，晋朝任秦州刺史。祖裴邕，从河东迁居襄一一。父顺宗、兄叔宝仕官  萧道成  (《魏书白话版》人物)，都有名位。
裴叔业少有气度才干，颇以将略自许。出仕萧赜，历任右军将军、东中郎将谘议参军。萧鸾见到叔业便大为惊奇，对他说：“卿有如此有志之相，何怕不大富贵。应该不断努力。”萧鸾任职豫州，引荐他为司马，带领陈留太守。萧鸾入朝辅政，裴叔业经常埋伏壮士数百人于建业。等到萧鸾废除昭文帝，叔业率众前去支援。萧鸾自立为帝，任命裴叔业为给事黄门侍郎，封为武昌县开国伯，食邑五百户。高祖南巡，车驾停驻钟离。萧鸾拜叔业为持节、冠军将军、徐州刺史，率水军进到淮河边。离魏王军马十里，魏高祖令尚书郎中裴聿前去与他交谈。裴叔业盛饰左右衣服玩好对裴聿夸口说：“我在南方富贵正如你现在所看到的，哪像你在那边这种简陋的样子呢。”裴聿说：“伯父仪服的确很华美，但是惟恨不能白日出游耳。”迁为辅国将军、豫州刺史，屯军寿一一。
萧鸾死，子宝卷自立，迁任裴叔业本将军、南兖州刺史。逢陈显达围攻建业，裴叔业派司马李元护率军支援萧宝卷，其实是响应陈显达。显达军败还归。裴叔业以内难未止，不愿任职南兖州，因其离建业近，受制于人。宝卷宠幸的人茹法珍、王..之等怀疑他有异心，去去来来的人都说裴叔业是北方的人。叔业兄子裴植、裴..、裴粲等，弃母逃奔寿一一。茹法珍等以其既在疆场，情急之下就会招引魏兵，无法控制他，准备拘禁起他，告诉宝卷派中书舍人裴长穆慰犒诱引他，叔业收下了东西但没钻进圈套。
叔业虽说得到了调停，但仍忧惧不已，派亲近的人马文范到萧宝卷的雍州刺史  萧衍  (《魏书白话版》人物)那里寻求自安自保的计策说：“天下之事，大势可知，恐怕现今没有自立之理。雍州如能牢牢把住襄一一，辄当戮力自保；如不然，回面向魏，也可作河南公。”萧衍派文范报说：“群小用事，能维持多久。多派人相代，力量不允许；少派人，则又于事不足。想来想去，一无所成。你只有送家属到京城以安慰他们，自然没有祸患。如若他们意外相逼，我就统领马步兵二万直出横江，断他们后路，则天下事就可一举而定了。你若想向北，魏廷必定派人取代你，把你处置在黄河北面某地，河南公哪里还能得到？像这样则南归的希望就断绝了。”裴叔业犹豫不决，派信使到豫州刺史薛真度那里去，询访入魏国可否事宜。薛真度写信作答，大讲魏朝风化惟新之美，知卿不是没有投诚之心，只是自己不能早下断决罢了。但是怕临时情急之下，就不会那么从容不迫了。
裴叔业迟迟下不了反叛的决心，薛真度也派使者再做他的工作。叔业于是派儿子裴芬之及兄女丈夫韦伯昕奉表附朝廷。景明元年(500)正月，世宗下诏说：“裴叔业明敏秀发，归魏英款早悟，驰表送诚，忠心高节，振扬往古，应加以褒扬，以彰扬先知先觉的人。可任为使持节，散骑常侍，都督豫、雍、兖、徐、司五州诸军事，征南将军，豫州刺史，封兰陵郡开国公，食邑三千户。”又赐给叔业玺书说：“前后使者往返，有敕书，想必卿已明朕心一二。萧宝卷昏狂，日滋月甚，一一H一一虐遍及宰辅，横暴乃加贵戚，一一H一一刑既逞，朝无孑遗，国有瓦解之形，家无自安之计。卿你兼具智勇，深有祸兆，翻然反叛，高举义旗，去除这种危机祸乱。朕日想夜念，深深称赞你的功勋。前番即敕豫州沿边诸镇兵马，前往赴援。杨大眼、奚康生铁骑五千，急驱上路；彭城王元勰、尚书令王肃一精一兵十万，络绎继发。准备长驱淮海，电击衡山、巫山。卿可同心戮力，里应大举。殊功茂绩，所凭卿为，高名厚禄，舍你取谁？朕并有敕给州中佐吏以及南方人士，只要谁有微功片绩，朕必定加以褒赏。”军队没来得及渡过淮河，裴叔业病逝，享年六十三岁。李元护、席法友等推举裴叔业兄长的儿子裴植监理州事。魏廷赠给他开府仪同三司，其余官爵仍旧。谥称忠武公，赐给东园温明秘器、朝服一套、钱三十万、绢一千匹、布五百匹、蜡三百斤。